动物组织/细胞基因组快速提取试剂盒
产品分类： 基因组DNA抽提
主要产品有：本试剂盒的抽提试剂采用独特的配方和添加剂，能高效的裂解细胞和组织，分离出高纯度的基因组DNA，还可以有效地抑制各种外源性和内源性的核酸酶，同时结合特制的纯化柱，能最大限度的保持核酸的完整性、高得率以及纯度。
订购热线：
立即咨询 说明书下载Quick Animal Tissue/Cell Genomic DNA Extraction Kit
动物组织/细胞基因组快速提取试剂盒
产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品价格 |
LG-0102A | 动物细胞/组织基因组快速提取试剂盒 | 50次 | 400.00元 |
LG-0102B | 100次 | 720.00元 |
【产品简介】
本试剂盒的抽提试剂采用独特的配方和添加剂，能高效的裂解细胞和组织，分离出高纯度的基因组DNA，还可以有效地抑制各种外源性和内源性的核酸酶，同时结合特制的纯化柱，能最大限度的保持核酸的完整性、高得率以及纯度。
【试剂盒组成】
试剂盒组成 | LG-0102A(50次) | LG-0102B(100次) |
RNA酶A | 250μl | 500μl |
蛋白酶K | 10mg | 20mg |
裂解液SE | 18ml | 36ml |
裂解液PDB | 18ml | 36ml |
漂洗液WB1 | 20ml | 40ml |
漂洗液WB2 | 12ml | 24ml |
洗脱液EB | 2×2ml | 4×2ml |
离心纯化柱 | 50个 | 100个 |
说明书 | 1份 | 1份 |
注意：使用前请在蛋白酶K管中加入适量灭菌双蒸水至20mg/ml，漂洗液WB1和WB2中加入适量无水乙醇。
【试剂运输及储存条件】
试剂运输可在常温环境下进行。储存时，蛋白酶K干粉于4℃保存，RNA酶A和稀释后的蛋白酶K溶液于-20℃保存，试剂盒其余组分室温保存。
【操作步骤】
1. 从组织中提取基因组DNA，在冷冻的研钵中切下一小块深层冷冻的组织样品，并用电子天平称量。然后立即将该组织转移至加有300μl裂解液SE的无核酸酶的离心管中，用电动匀浆机在冰浴中匀浆组织约15s直到看不见明显的组织块，之后操作见第3步。
注意：组织样品应储存于液氮或低温冰箱(-80℃)。该实验流程只适用于10-30mg的组织样品中抽提核酸。
2. 从细胞样品中提取基因组DNA，先把培养皿或培养瓶置于冰上，弃尽培液，用预冷的1XPBS洗涤细胞两次。然后加入300μl裂解液SE，用细胞刮刮下所有细胞，将裂解物转移至无核酸酶的1.5ml离心管中，充分振荡30s，之后操作见第3步。
注意：1. 试剂盒中不提供1XPBS，另外配制。2. 重悬细胞还可以先将细胞2000xg，离心3min，用1XPBS洗涤后再加入300μl裂解液SE。3. 该实验流程只适用于从少于106细胞和少于20mg组织中提取核酸。
3. 往裂解物中依次加入280μl裂解液PDB,5μl RNA酶A和10μl蛋白酶K（20mg/ml）溶液,用移液器吸打混匀，于55℃温水浴消化30min。
注意：请不要漩涡震荡
4. 往裂解物中加入200μl三氯甲烷，颠倒或摇动混匀，室温静置1min，11,000xg室温离心10min。
注意：请不要漩涡震荡
5. 小心吸取上清至一新的1.5ml离心管中，往裂解物中加入0.6倍上清体积的预冷异丙醇，轻柔颠倒混匀。
6. 立即吸取700μl样品以及有可能形成的沉淀，加入带有2ml收集管的离心纯化柱。轻盖盖子，11,000xg，室温离心1min，收集流穿液在另一新的1.5ml离心管中。
7. 将剩余的样品转移至离心柱，重复第6步。
8. 往离心柱中加入700μl漂洗液WB1，轻盖盖子，室温静置1min，11,000xg，室温离心1min，弃尽废液。
注意：第一次使用前请确认是否已经往漂洗液WB1中加入适量无水乙醇。
9. 往离心柱中加入500μl漂洗液WB2，11,000xg , 室温离心1min，弃尽废液。
注意：第一次使用前请确认是否已经往漂洗液WB2中加入适量无水乙醇。
10. 往离心柱中加入500μl漂洗液WB2，11,000xg , 室温离心1min，弃尽废液。
11. 11,000xg离心空柱1min干燥硅胶膜。
12. 将离心柱转移至新的无核酸酶的1.5ml离心管中，往硅胶膜中央滴加50μl洗脱液EB，轻盖管盖，室温静置2-3min，11,000xg离心1min洗脱基因组DNA。
13. 把洗脱液滴加回硅胶膜重复第12步洗脱。
14. 如需后续操作，请始终将溶解的DNA至于冰上，保存请置于-80℃。
【DNA定量】
实例：用常规比色皿测量RNA浓度。
DNA样品总体积：50μl
稀释因子，1:100（10μl DNA样品+990μl无核酸酶高压灭菌水）
A260读值：0.20（在1ml比色皿中测量）
因此，DNA样品浓度= 50×A260×稀释因子=50×0.20×100=1000μg/ml
DNA样品的得率=1000×0.05=50μg
实例：用超微量比色皿测量DNA浓度。
DNA样品总体积：50μl
稀释因子，1:100（1 μl DNA样品+99 μl无核酸酶高压灭菌水）
A260读值：0.20（在超微比色皿中测量）
因此，DNA样品浓度= 50×A260×稀释因子=50×0.20×100=1000μg/ml
DNA样品的得率=1000×0.05=50μg
【注意事项】
1. 操作时请使用一次性手套和口罩。
2. 第一次使用前请确认是否已经往漂洗液WB1和WB2中加入适量乙醇。
3. 第一次使用前请确认是否已经往蛋白酶K管中加入适量灭菌双蒸水。
4. 洗脱液EB如预先在65℃温水浴，会提高基因组DNA的回收率。
注：本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床治疗、食品及化妆品等用途。
