血液(血清/血浆)DNA抽提试剂盒

Blood(Serum/Plasma) Total  DNA  Extraction Kit

血液(血清/血浆)总DNA抽提试剂盒

 【产品简介】

游离循环核酸(Free circulating nucleic acids，简称cfDNA)是一种存在于动植物和人的体液中的细胞外游离状态核酸。目前已经在血浆、血清、尿液、前列腺液、支气管灌洗液、唾液、脑脊液、胃液、胆汁、淋巴液、腹腔液及粪便中检测到了游离循环核酸。已发现的游离循环核酸包括游离循环DNA和游离循环RNA。游离型DNA在正常人血液中含量甚微，甚至13ng/ml[1], 而机体在一些特殊状态时（如患有肿瘤、自身免疫疾病、感染性疾病、中风、心肌梗死及妊娠等），其含量明显上升，比如恶性肿瘤平均值达到180ng/ml[1].

本试剂盒采用独特的配方和添加剂，能高效的分离血清、血浆及其它无细胞体液等样品中分离出游离的DNA，另外本试剂还可以有效地抑制各种外源性和内源性的DNA酶，同时结合特制的纯化柱，能最大限度的保持DNA的完整性、高得率以及纯度，并能保留DNA，为需要进行DNA研究。

【试剂盒组成】

注意：1.使用前请在漂洗液WB加入适量无水乙醇.

2.低温情况下，裂解液LZ有析出情况，请将其室温放置，待其完全溶解后使用。

3. 本试剂盒使用DNA吸附柱回收DNA，最小洗脱体积30ul。

【试剂运输及储存条件】

试剂运输可在2-8℃环境下进行。储存时，裂解液LZ须置4℃保存，其余组分可保存在室温。

【操作步骤】

1.       取200-300ml的血液（血清）样品，加入1ml裂解液LZ，用移液器吹打数次混匀。

2.       将裂解物转移至另一新的无DNA酶离心管中，并加入1.5倍体积的无水乙醇，用移液器吹打数次混匀。

注意：由于实验室常用1.5ml离心管，建议裂解物可分成两管，然后分别向其内加入1.5倍无水乙醇。

3.       立即吸取700μl样品以及有可能形成的沉淀，加入带有2ml收集管的离心纯化柱，轻盖盖子，室温静置2min。10,000 x g，室温离心15s，弃尽废液。

4.       将剩余的样品转移至离心柱，重复第3步。并向离心柱中加入10μl RNA酶A,室温静置5分钟。

5.       往离心柱中加入500μl漂洗液WB，轻盖盖子，10,000 x g，室温离心15s，弃尽废液。

注意：第一次使用前请确认是否已经往WB中加入适量无水乙醇。

6.       重复第5步，往离心柱中加入500μl漂洗液WB，轻盖盖子，10,000 x g，室温离心15s，弃尽废液。洗涤后10,000 x g离心空柱2min干燥硅胶膜。

注意：完全去除洗液对最后溶解是非常重要的，洗液的残留会影响最终的洗脱。

7.       将离心柱转移至一新的无DNA酶的1.5ml离心管中，往硅胶膜中央滴加洗脱液EB，轻盖管盖，室温静置5min，11,000 x g 离心1min洗脱DNA。

注意：洗脱体积不宜小于30μl，否则会影响洗脱效果。

8.       把洗脱液滴加回硅胶膜重复第7步洗脱。

9.       如需后续操作，请始终将溶解的DNA至于冰上，保存请置于-80℃。