Custom Reverse Transcription Kit

Custom Reverse Transcription Kit

【产品简介】

Custom Reverse Transcription Kit是RT用的最佳反转录反应试剂，专为两步法RT第一步实验配制的，具有高灵敏度，可以从极低量的总RNA或poly(A)⁺ RNA合成第一链cDNA。与PCR反应相结合，可用于检测稀有基因的表达、从极少量细胞中定量检测特定mRNA的表达水平、克隆特定基因的cDNA片段等。

【注意】

1.用于cDNA合成反应的溶液试剂尽可能用DEPC进行处理，并在高压灭菌后使用。有些试剂不能高压灭菌时，首先用经过灭菌的器具、水等配制溶液后，再将溶液进行过滤除菌处理。

2.RNA样品要避免基因组DNA污染。

3.避免多次反复冻融RNA。

4.试剂盒的各组成成分应在-20℃保存。

5.cDNA产物应置于-20℃保存

【试剂盒组成】

【试剂运输及储存条件】

试剂盒运输可在2-8℃环境下进行。储存时，须置-20℃保存。本试剂盒有效期为12个月，在有效期内使用。

【操作步骤】

注意：下列操作步骤适用于模板量为50ng-2μg的总RNA，如果总RNA量大于2μg，请按比例扩大反应体系。

1.将模板RNA完全融化并至于冰浴中，将特异性引物、RT Master Mix、RT Enzyme Mix、RNase Free ddH₂O溶解后，稍微震荡混匀，离心后置于冰浴中。

2.反转录试剂准备：在冰浴条件下按下表配制反应液

注意：当同时需要进行多次RT反应时，将各组分加倍混合后再分装到每个反应管中，可以减少实验操作产生的误差，使所取的试剂体积更准确，减少试剂损失。

3. 反转录扩增检测（在扩增检测区进行）循环参数设定：（请参照各类仪器的操作软件进行设置）

  注：本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床治疗、食品及化妆品等用途。