M-MuLV反转录酶

M-MuLV反转录酶

【产品简介】

莫洛尼氏鼠白血病病毒 (M-MuLV) 反转录酶是一种RNA介导的DNA聚合酶。该酶能以RNA (合成cDNA时) 或单链DNA为模板(1-3)，由引物起始合成一条互补的DNA。M-MuLV反转录酶无3´→5´核酸外切酶活性。

来源：重组E. coli菌株，含有从M-MuLV中克隆的反转录酶基因。

【试剂组成】

【试剂运输及储存条件】

试剂运输可在-20℃环境下进行。储存时，须置-20℃保存。本试剂盒有效期为12个月，在有效期内使用。

【酶贮存溶液】

20 mM Tris-HCl (pH 7.5 @ 25°C)，200 mM NaCl，0.1 mM EDTA，1 mM Dithiothreitol (DTT)，0.01% NonidetTM P-40 (NP-40) (V/V)，50%甘油(V/V)。

【反应条件】

1×M-MuLV反转录酶反应缓冲液，适量dNTPs (不随酶附赠)，37°C或42°C温育。

1×M-MuLV反转录酶反应缓冲液: 50 mM Tris-HCl (pH 8.3, 25°C), 75 mM KCl, 3mM MgCl2, 10 mM DTT。

【活性定义】

1单位指以poly (rA) 为模板、oligo (dT) 为引物，在37°C条件下，10分钟内催化1 nmol的dTTP 掺入形成酸不溶性沉淀物所需要的酶量。

热失活条件：65°C加热20分钟失活。

【质量控制检测】

1.         核酸内切酶活性：50 μl反应体系中，500 U本酶与1 μg的pUC19质粒于37°C温育4小时，电泳条带无明显变化。

2.         核酸外切酶活性：50 μl反应体系中，2000 U本酶与1 μg的Hind III消化的λDNA于37°C温育4小时，电泳条带无明显变化。

3.         RNase活性：25 μl反应体系中，1000 U本酶与250 ng的大肠杆菌rRNA于37°C温育2小时，经琼脂糖电泳检测，被降解的rRNA小于1%。

4.         纯度：经SDS-PAGE (考马斯亮蓝染色) 检测其纯度大于90%。

【用 途】

1.         cDNA合成反应。

2.         合成cDNA探针。

注：本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床治疗、食品及化妆品等用途。