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真菌基因组DNA提取试剂盒(离心柱)

产品分类: 基因组DNA抽提

主要产品有:本产品用于快速提取各种真菌的基因组DNA,其中包括酵母(如:Saccharomyces cerevisiae、Schizosaccharomyces pomb、Pichia pastoris)、动物病原真菌(如:Candida albicans、Aspergillus niger)和植物病原真菌(如:Collectotrichum musae、Fusarium oxysporum)。纯化的基因组DNA可用于多种研究,比如酶处理分析、Southern blotting、克隆、PCR分析以及扩增等。

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产品详情

Fungus Genomic DNA Extraction KitSpin Colunm

真菌基因组DNA提取试剂盒(离心柱)

产品编号

产品名称

产品规格

产品价格

LG-0109A

真菌基因组DNA提取试剂盒(离心柱)

50

400.00

LG-0109B

100

720.00

                                              

产品简介

    本产品用于快速提取各种真菌的基因组DNA,其中包括酵母(如:Saccharomyces cerevisiae、Schizosaccharomyces pomb、Pichia pastoris)、动物病原真菌(如:Candida albicans、Aspergillus niger)和植物病原真菌(如:Collectotrichum musae、Fusarium oxysporum)。纯化的基因组DNA可用于多种研究,比如酶处理分析、Southern blotting、克隆、PCR分析以及扩增等。

 

试剂盒组成

试剂盒组成

LG-0109A( 50次)

LG-0109B (100次)

裂解液PLB

36ml

72ml

RNase A(10mg/ml)

500μl

1ml

漂洗液WB1

15ml

30ml

漂洗液WB2

12ml

24ml

洗脱液EB

2×2ml

4×2ml

离心纯化柱

50个

100个

说明书

1份

1份

注意:使用前请在按照标签提示漂洗液WB1WB2中加入适量无水乙醇。如不立即使用,RNase置4保存。

 

【试剂运输及储存条件】

试剂运输可在室温环境下进行。4℃长期保存,有效期一年。

 

自备实验器材

试剂类:异丙醇、无核酸酶水。

耗材类:经无核酸酶水处理并高压灭菌(121℃,30分钟)的2ml和1.5ml离心管及10μl、200μl、1000μl吸嘴、一次性手套、口罩。

设备类:电动匀浆机、各种规格的移液器、低温和常温台式离心机、震荡仪、研钵,手术刀,金属镊,水浴锅,冰盒。

 

【操作步骤】

1.       取适量真菌菌丝(200-500mg)用电子天平称量,放入液氮中研磨至粉末状。然后立即将该组织转移至加有600μl裂解液PLB的无核酸酶的离心管中,如仍有块状物质,用电动匀浆机在冰浴中匀浆组织约15s直到看不见明显的组织块。

注意:如果裂解液PLB有沉淀,需先在65℃加热溶解后摇匀再使用。

处理标本前可以先往PLB中加入1-4%巯基乙醇。

2.       用移液器吸打混匀,65℃水浴10-30min,每隔5 min上下轻轻颠倒混匀。

3.       4离心10min,小心吸取上清至RNase-Free的离心管中,吸头尽量避免接触收集管中的残渣碎片。分离出的上清液中加入10μl RNase A,用移液器缓慢吸打混匀,37℃放置10 min。

4.       冷却至室温后,加入500μl三氯甲烷,充分混匀离心管直至混匀,切勿漩涡震荡。10,000 rpm离心5min。

5.       小心吸取上清至另一干净的无核酸酶的离心管中,加入0.6倍上清体积的预冷异丙醇,轻柔颠倒数次直至彻底混匀。

6.       吸取700μl裂解物以及有可能形成的沉淀至纯化柱,室温11,000rpm离心15s。

7.       弃尽流穿液,重复步骤6,直至将剩余样品全部通过纯化柱。

8.       往纯化柱内加入500μl漂洗液WB1,室温11,000rpm离心15s,弃尽流穿液。

注意:第一次使用前,按照标签提示加入适量无水乙醇。

9.       往纯化柱内加入500μl漂洗液WB2,重复步骤9。

注意:第一次使用前,按照标签提示加入适量无水乙醇。

10.   室温11,000rpm离心空柱1min干燥硅胶模。

11.   往膜中央滴加50μl 65℃预热的洗脱液EB,室温放置5min,室温11,000rpm离心1min,收集DNA。

12.   重复步骤11。

 注意:为增加基因组DNA的得率,洗脱液体积不应少于50μl,体积过小会影响回收效率,洗脱液的pH值也对洗脱效率有很大影响,若用ddH2O洗脱液应保证pH 7.0-8.5范围内,pH低于7.0会影响洗脱效率;DNA需置于-20℃保存,以防止DNA降解。

 

【注意事项】

1. 操作时请使用一次性手套和口罩。

2. 第一次使用前请确认是否已经往漂洗液WB1,WB2中加入适量乙醇。

3. 为增加洗脱效果,可将洗脱液EB于65℃水浴加热后使用。

 

【有效期】

本试剂盒有效期为12个月,请在有效期内使用。

 

:本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床治疗、食品及化妆品等用途。

 


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