超敏型ECL化学发光试剂盒

超敏型ECL化学发光试剂盒

【产品简介】

   本产品发光液用于 Western、Northern 和Southern blot分子杂交的化学发光检测，比传统化学显色法灵敏度高，可达 fg 水平。原理是采用新型发光底物（Luminol），其与辣根过氧化物酶反应时产生很强的发光信号，在暗室中对 X-光片感光，以此检测微量蛋白而获得理想的实验结果。本产品具有极高灵敏度高，持续时间长等特点。本试剂盒为非放射性检测系统，对人体无害，同时具有高灵敏度和分辨率，背景低，灵敏度低飞克级。适用于PVDF膜和硝酸纤维素膜。

【试剂盒组成】

【运输及储存条件】

4℃避光保存，一年有效。

【注意事项】

超敏型ECL化学发光试剂盒A液和B液在吸取过程中必须要更换枪头，A液和B液相互污染后会导致A液或B液逐渐失效，影响后续的使用效果。各溶液使用后，请盖紧瓶盖，以防失效。特别是B液，含有氧化剂，比较容易被还原而失效。超敏型ECL化学发光试剂盒的荧光持续时间很长，但开始反应后的30分钟内荧光更强一些，随后荧光会逐渐减弱，因此请注意充分利用这荧光较强的30分钟进行压片。超敏型ECL化学发光试剂盒A液和B液均对人体有害，操作时请注意适当防护。为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【使用说明】

1. ECL工作液的配制：等体积混合适量超敏型ECL化学发光试剂盒A液和B液，室温放置备用。工作液宜在临检测前配制。

2. Western二抗孵育后，并进行数次洗涤后，用平头镊将膜取出，用吸水纸略吸去过多的液体(切勿接触膜的蛋白面)，然后置于一洁净保鲜膜上。

3.根据膜的大小，按每10平方厘米膜加1ml 超敏型ECL化学发光试剂盒工作液的比例，滴加超敏型ECL化学发光试剂盒工作液到膜上，确保使工作液均匀覆盖在膜上，放置1-5分钟。

注意：本试剂灵敏度极高，进行内参抗体检测时候，需要适当的减少一抗及二抗用量，并适当缩短曝光时间。

目的蛋白检测时间需根据抗体表达量高低进行相应的调整，表达量较低的抗原检测，可以适当延长时间。

5. 取膜，弃超敏型ECL化学发光试剂盒工作液，用吸水纸略吸去过多的液体。将膜放在两片保鲜膜中间，随后进行压片检测或荧光成仪检测。

6. 压片检测：将膜固定于片夹内。暗室内压片1分钟，立即显影定影，根据结果再调整压片时间。或直接分别压片30秒，1，3，5分钟，然后一起显影定影观察结果。

注意：根据信号强弱调整曝光时间，可重复曝光至结果满意。

7.        荧光成像仪检测：将膜放置到荧光成像仪内，参考仪器说明书进行检测。