Stemaim-it miR qRT-PCR Primer Set（microRNA荧光定量引物套装）

                                                                       Stemaim-it miR qRT-PCR Primer Set

【产品简介】

Stemaim-it miR qRT-PCR miRNAs定量检测方法，采用特异性的Stem-loop RT adapter与miR PCR Primer双重保证，确保反应不受其前体及其他因素干扰，序列高度同源的miRNAs也可精确区分。精确定量，可对目标miRNA分子多少进行准确定量。检测灵敏度高，样品消耗量少，仅需1-10ng的total RNA或同等物。同时又具备超宽的定量线性范围，结合Custom Reverse Transcription Kit（LR-0102A/B及Real-Time PCR Kit (SYBR Green)（LK-0101A/B），使结果更加准确可信，从几个拷贝一直到几百万个拷贝，定量线性范围跨越7个数量级。可实现对目标miRNA分子进行准确定量并具有很好的重复性，此引物也可以结合One Step Real-Time PCR Kit (SYBR Green)（LK-0104A/B）进行一步法的绝对定量检测。

【试剂盒组成】

注意：引物稀释根据引物标签上提示，加入适量的无核酸酶水溶解。

【操作步骤】

反转录反应：

注意：以下举例反转录反应体系为20μl反应体系，若调整反应体系，可相应比例的调整引物的用量。

循环参数设定：（请参照各类仪器的操作软件进行设置）

将逆转录的cDNA取出2μl作为模板进行PCR反应（20μl反应体系）

PCR反应：

注意：以下举例PCR反应体系为20μl反应体系，若调整反应体系，可相应比例的调整引物的用量。

PCR反应循环参数设定：（请参照各类仪器的操作软件进行设置）

结果检测：反应结束后取10μl 反应产物，琼脂糖凝胶电泳检测。

【注意事项】

1.待检标本若不及时检测,应保存于-20℃。

2.实验相关耗材应用0.1％DEPC(焦碳酸二乙酯)水溶液在37℃处理12小时,并高压灭菌30分钟后使用。

3.试剂盒各组份使用前请充分融化并摇匀,离心管内的试剂需离心数秒后使用。

4.PCR操作各阶段应在不同实验区域进行，包括PCR扩增试剂准备区、标本处理区及PCR扩增检测区。  

5.人的皮肤表面和唾液都有RNase,应穿工作服，戴一次性手套（经常替换手套），使用一次性用品。

6.PCR操作人员应具有经验和受过培训。

7.操作过程中用到的超净台、加样枪、离心机、扩增仪等仪器设备应经常用10%次氯酸或70%乙醇及紫外灯处理。

8.实验中废弃的吸嘴应弃于含10%次氯酸的废液缸中, 以防止污染。

9.试验后，扩增管切勿打开，并且将其丢弃在实验区以外区域。

【试剂运输及储存条件】

试剂盒运输可在常温环境下进行。储存时，须置-20℃保存。

【有效期】

本试剂盒有效期为12个月，请在有效期内使用。

注：本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床治疗、食品及化妆品等用途。