One Step Stemaim-it miR qRT-PCR Kit Quantitation (Probe)

One Step Stemaim-it miR qRT-PCR Kit Quantitation (Probe)

【产品简介】

本制品是采用Taqman探针进行miRNAs qRT-PCR的专用试剂。Stemaim-it miR qRT-PCR miRNAs定量检测方法，采用特异性的Stem-loop RT adapter与miR PCR Primer双重保证，确保反应不受其前体及其他因素干扰，序列高度同源的miRNAs也可精确区分。精确定量，可对每个细胞所含的目标miRNA分子多少进行准确定量。检测灵敏度高，样品消耗量少，仅需1-10ng的total RNA或同等物。同时又具备超宽的定量线性范围，从几个拷贝一直到几百万个拷贝，定量线性范围跨越7个数量级。可实现对目标miRNA分子进行准确定量并具有很好的重复性。

【试剂盒组成】 

【操作步骤】

1.       完全融化模板，OneStep PCR Mix(2×)、OneStep Enzyme Mix、OneStep Primer Mix等试剂融化并离心，之后置于冰浴中。

2.       试剂准备：在冰浴条件下按下表配制反应液（举例）

3.  循环参数设定：（请参照各类仪器的操作软件进行设置）

     注意：因有些厂家的荧光定量PCR仪不能够降温至16℃只可以达到25℃，此时也可以在25℃进行退火步骤1。

【注意事项】

1.待检标本若不及时检测，应保存于-20℃。

2.实验相关耗材应用0.1％DEPC(焦碳酸二乙酯)水溶液在37℃处理12小时，并高压灭菌30分钟后使用。

3.试剂盒各组份使用前请充分融化并摇匀，离心管内的试剂需离心数秒后使用。

4.PCR操作各阶段应在不同实验区域进行，包括PCR扩增试剂准备区、标本处理区及PCR扩增检测区。   

5.人的皮肤表面和唾液都有RNase，应穿工作服，戴一次性手套（经常替换手套），使用一次性用品。

6.PCR操作人员应具有经验和受过培训。

7.操作过程中用到的超净台、加样枪、离心机、扩增仪等仪器设备应经常用10%次氯酸或70%乙醇及紫外灯处理。

8.实验中废弃的吸嘴应弃于含10%次氯酸的废液缸中，以防止污染。

9. 实验后，扩增管切勿打开，并且将其丢弃在实验区以外区域。

【试剂运输及储存条件】

试剂盒运输可在2-8℃环境下进行。（含有ROX内参染料），储存时，须置-20℃避光保存。

【有效期】

本试剂盒有效期为12个月，请在有效期内使用。

注：本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床治疗、食品及化妆品等用途。