One Step Stemaim-it miR qRT-PCR Quantitation Kit(SYBR Green)

One Step Stemaim-it miR qRT-PCR Kit Quantitation (SYBR Green)

【产品简介】

本制品是采用嵌合荧光法（SYBR^® Green I）进行miRNAs 实时荧光定量检测，采用特异性的Stem-loop RT adapter与特异性的PCR扩增引物双重保证，确保反应不受其前体及其他因素干扰，序列高度同源的miRNAs也可精确区分。采用高效的反应体系，利用一步法使RT和PCR在同一反应体系中进行，反应过程中不需要添加试剂，无需打开管盖，避免了污染，精确定量，可对每个细胞所含的目标miRNA分子多少进行准确定量。同时具备超宽的定量线性范围，从几个拷贝一直到几百万个拷贝，定量线性范围跨越7个数量级。可实现对目标miRNA分子进行准确定量并具有很好的重复性。

【试剂盒组成】

【操作步骤】

1.       完全融化模板，OneStep PCR Mix(2×)、OneStep Enzyme Mix、OneStep Primer Mix等试剂融化并离心，之后置于冰浴中。

2.       试剂准备：在冰浴条件下按下表配制反应液（举例）

注意：ABI Prism7500，ABI Prism7500 Fast, MJ Research Chromo4，Corbett Rotor Gene 3000机型，添加ROX Reference Dyev 0.04µl/反应（0.1X）。

ABI Prism7000/7300/7700/7900 , Eppendorf , ABI Step One, ABI Step One Plus机型，添加ROX Reference DyeI 0.4µl/反应(1X)。

3.  循环参数设定：（请参照各类仪器的操作软件进行设置）

     注意：因有些厂家的荧光定量PCR仪不能够降温至16℃只可以达到25℃，此时也可以在25℃进行退火步骤1。

结果检测：反应结束后取10ml反应产物，琼脂糖凝胶电泳检测。

【试剂运输及储存条件】

试剂盒运输可在2-8℃环境下进行。

【有效期】

本试剂盒有效期为12个月，请在有效期内使用。

注：本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床治疗、食品及化妆品等用途。