SYBR Green I(10000X)

SYBR Green I(10000X)            

产品简介

SYBR Green I与dsDNA 结合荧光信号可增强800～1000倍。在PCR反应体系中，加入过量SYBR Green I荧光染料，它特异性地掺入DNA双链后，荧光信号增强，而不掺入链中的SYBR Green I染料分子荧光不变，从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。荧光可以在退火阶段或者延伸阶段测定。

浓度：10000X 浓缩液

储运温度：常温运输，-20℃长期保存，避免反复冻融。短期使用可放4℃。

使用方法：

1.荧光定量PCR

将10000X SYBR Green I浓缩液加入到PCR反应体系，使终浓度为0.5×（0.2×到1×之间调整）。

2.核酸电泳

SYBR Green I预染方法

1. 该方法适用于琼脂糖凝胶电泳和PAGE凝胶电泳

2. 工作液的配制：用电泳缓冲液将10000×的SYBR GreenⅠ稀释100倍，即为SYBR GreenⅠ工作液。SYBR GreenⅠ工作液可以置2-8℃冷藏一个月以上。

3. 制胶：按常规方法制胶，不含任何染料。

4. 样品染色：向分析样品中加入SYBR GreenⅠ工作液和载样缓冲液，室温放置10分钟，使SYBR GreenⅠ与样品中DNA充分结合。SYBR GreenⅠ工作液加入量为总上样量的1/10。

5. DNA Marker染色：将5μL DNA Marker和1μLSYBR GreenⅠ工作液混匀，室温放置5分钟，使SYBR GreenⅠ与DNA充分结合。

6. 上样、电泳：按常规操作。

7.检测：紫外灯下观察。

SYBR Green I后染方法

1. 按照常规方法进行电泳。

2. 用PH 7.0 - 8.5 的缓冲液（如：TAE，TBE 或 TE），按照10000：1的比例稀释SYBR GreenⅠ浓缩液，混匀，制成染色溶液。

3. 将染色溶液倒入合适的聚丙烯容器中，放入凝胶，用铝箔等盖住容器使染料避光。室温振荡染色10-30分钟，染色时间因凝胶浓度和厚度而定。聚丙烯酰胺凝胶直接在玻璃平皿上染色，将配好的工作溶液轻轻地倒在胶板上，让工作液均匀地覆盖整个胶板，并染色30分钟。玻璃平皿必须预先经过硅烷化溶液处理（避免染料吸附在玻璃表面上）。

4.观测聚丙烯酰胺凝胶时，可直接将托有凝胶的玻璃平皿放入紫外灯下观测。

注：本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床治疗、食品及化妆品等用途。