HotStart qPCR SYBR Green MiX (2X)
产品分类： 定量PCR相关制品
主要产品有：HotStart qPCR SYBR Green Mix (2X)是采用SYBR® Green I嵌合荧光法进行Real-Time PCR的专用试剂。产品包含PCR Master Mix(2×)及Hotstart Taq DNA Polymerase，其中PCR Master Mix(2×)含有PCR反应的增强剂和优化剂以及稳定剂，浓度为2×，同时添加了ROX内参染料，使结果更加准确可信。本制品具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点，可最大限度的减少人为误差。适用于高特异性PCR 反应、复杂模板如GC含量高（>60%），有二级结构等的扩增和大规模基因检测。
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产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品价格 |
LK-0108A | HotStart qPCR SYBR Green MiX (2X) | 100次 | 300.00元 |
LK-0108B | 500次 | 1350.00元 |
【产品简介】
HotStart qPCR SYBR Green Mix (2X)是采用SYBR® Green I嵌合荧光法进行Real-Time PCR的专用试剂。产品包含PCR Master Mix(2×)及Hotstart Taq DNA Polymerase，其中PCR Master Mix(2×)含有PCR反应的增强剂和优化剂以及稳定剂，浓度为2×，同时添加了ROX内参染料，使结果更加准确可信。本制品具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点，可最大限度的减少人为误差。适用于高特异性PCR 反应、复杂模板如GC含量高（>60%），有二级结构等的扩增和大规模基因检测。
【试剂盒组成】
试剂盒组成 | LK-0105A(20ml×100次) | LK-0105B (20ml×500次) |
HS PCR Mix(2×) | 1ml×1支 | 1ml×5支 |
RNase Free ddH2O | 1ml×1支 | 1ml×5支 |
说明书 | 1份 | 1份 |
【适用荧光PCR仪器】
以下机型需要另购Rox Reference Dye(25mM)货号： LK-0113。
注意：ABI Prism7500，ABI Prism7500 Fast, MJ Research Chromo4，Corbett Rotor Gene 3000机型，添加ROX Reference Dyev 0.4µl/反应（0.1X）。
ABI Prism7000/7300/7700/7900 , Eppendorf , ABI Step One, ABI Step One Plus机型，添加ROX Reference DyeI 0.4µl/反应(1X)。
【试剂运输及储存条件】
试剂盒运输可在2-8℃环境下进行。储存时，须置-20℃避光保存。有效期为12个月，请在有效期内使用。
【操作步骤】
1. 完全融化模板DNA，将PCR Master Mix(2×)、特异性引物、NL Taq DNA polymerase离心后置于冰浴上。（注意：以下举例仅供参考，实际反应条件因模板、引物等的结构不同而各异，需根据实际情况，设定最佳反应条件。）
2. PCR试剂准备：在冰浴条件下按下表配制反应液。（注意：反应体系可以灵活调整，比如需要配制20ml反应体系，每个反应中加入PCR Master Mix(2×)相应的变为10ml，其它组分的终浓度不变并用ddH2O补足至20ml。建议最小反应体系不小于20ml, NL Taq HS用量不小于0.8U。）
反应成分 | 体积/反应 | 终浓度 |
PCR Master Mix(2×) | 10ml | 1× |
Forward Primer（20mM） | 0.25-0.5ml | 0.1-0.2 mM |
Reverse Primer（20mM） | 0.25-0.5 ml | 0.1-0.2 mM |
模板DNA | 3-5ml |
3. PCR反应循环参数设定：（请参照各类仪器的操作软件进行设置）
1. 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 | |
1 | 反转录反应 | 50℃ | 10分钟 | 1 |
2 | 预变性 | 94℃ | 3分钟 | 1 |
3 | 变性 | 94℃ | 10秒 | 40 |
延伸及检测荧光 | 60℃ | 40秒 | ||
步骤3中进行荧光检测 | ||||
结果检测：反应结束后取10ml反应产物，琼脂糖凝胶电泳检测。
注：本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床治疗、食品及化妆品等用途。
