尿嘧啶 DNA 糖苷酶(UNG 酶)
产品分类: 一般PCR相关制品
主要产品有:尿嘧啶DNA糖苷酶(UNG、UDG)来源于大肠杆菌重组克隆表达,分子量为25kDa,可催化含尿嘧啶的单链和双链DNA释放游离尿嘧啶。UNG酶对RNA无活性,主要应用于PCR扩增产物的防污染。其作用原理基于:如果在PCR反应中以dUTP替代dTTP掺入DNA中,形成了含dU碱基的PCR扩增产物,该酶能选择性断裂单链和双链DNA中U碱基的糖苷键,降解该PCR扩增产物。
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产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品价格 |
LH-0103A | 尿嘧啶 DNA 糖苷酶(UNG 酶) | 200U | 500.00元 |
LH-0103B | 1000U | 2250.00元 |
【产品简介】
尿嘧啶DNA糖苷酶(UNG、UDG)来源于大肠杆菌重组克隆表达,分子量为25kDa,可催化含尿嘧啶的单链和双链DNA释放游离尿嘧啶。UNG酶对RNA无活性,主要应用于PCR扩增产物的防污染。其作用原理基于:如果在PCR反应中以dUTP替代dTTP掺入DNA中,形成了含dU碱基的PCR扩增产物,该酶能选择性断裂单链和双链DNA中U碱基的糖苷键,降解该PCR扩增产物。
【储存缓冲液】
20mM Tris-HCl,150mM NaCl,1mM EDTA,1mM DTT,0.05% Tween20,50%glycerol,pH8.0. DNase活性检测
【活性定义】
37℃条件下,1小时降解1µg含dU碱基的单链DNA的酶量为1单位。
【质量控制】
1、SDS-PAGE电泳纯度大于98%;
2、降解活性、批间差异、稳定性;
3、1U UNG在37℃处理3分钟后,103拷贝以下含U模版应完全降解,不能产生扩增产物;
4、无外源核酸酶活性,无外源内切、外切核酸酶污染。
【反应条件】
先于37℃-50℃范围内消化5-10分钟,然后95℃ 3-5分钟灭活,(同时这一步也达到预变性和热启动的效果),随后进行PCR扩增。 UNG酶的反应可以在37℃-50℃, 5-10分钟的范围内变化,可以根据实验的需要进行调整。
【使用注意】
1、避免多次冻融,切勿暴露在温度波动较大之处。温度波动对产品的稳定性有极大影响。
2、UNG酶可以在PCR反应前清除不慎污染的含dUTP的PCR产物,从而避免由于污染导致的假阳性结果。
3、由于不同待扩增基因对dUTP的利用效率和对UNG酶的敏感度不同,因此,如果采用UNG体系导致检测灵敏度下降,应对反应体系进行调整优化。
4、扩增前后要使用专用的区域和移液器,戴手套操作并经常更换,PCR反应完成后切勿打开反应管。以最大限度的减少PCR产物对样品的污染。
【保存条件】
长期储存可保存于-70℃,但必须严格避免-70℃保存时的反复冻融。
注:本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床治疗、食品及化妆品等用途。