血液(血清/血浆)MicroRNA提取纯化试剂盒（离心柱）
产品分类： RNA及MicroRNA提取
主要产品有：本试剂盒的裂解抽提试剂采用独特的配方和添加剂，能高效的裂解细胞和组织，有效的去除大片段RNA，富集纯化200bp以下的小RNA。另外本试剂还可以有效地抑制各种外源性和内源性的核酸酶，同时结合特制的纯化柱，能最大限度的保持核酸的完整性、高得率以及纯度。
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血液(血清/血浆)MicroRNA提取纯化试剂盒（离心柱）
产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品价格 |
LN-0118A | 血液(血清/血浆)MicroRNA提取纯化试剂盒（离心柱） | 50次 | 500.00元 |
LN-0118B | 100次 | 900.00元 |
【产品简介】
本试剂盒的裂解抽提试剂采用独特的配方和添加剂，能高效的裂解细胞和组织，有效的去除大片段RNA，富集纯化200bp以下的小RNA。另外本试剂还可以有效地抑制各种外源性和内源性的核酸酶，同时结合特制的纯化柱，能最大限度的保持核酸的完整性、高得率以及纯度。
【试剂盒组成】
试剂盒组成 | LN-0118A (50次) | LN-0118B( 100次) |
裂解液LB | 50 ml | 100ml |
吸附液BD | 7ml | 14ml |
助沉剂PA | 200ml | 400ml |
漂洗液WB1 | 15 ml | 30 ml |
漂洗液WB2 | 6 ml | 12 ml |
离心纯化柱 | 50个 | 100个 |
洗脱液EB | 2x2 ml | 4x2 ml |
说明书 | 1份 | 1份 |
注意：第一次使用前，请按照标签提示向漂洗液WB1, WB2中加入适量无水乙醇。
【试剂运输及储存条件】
试剂运输可在常温环境下进行。储存时，可保存在室温。裂解液LB存放于4℃。本试剂盒有效期为12个月，请在有效期内使用。
【操作步骤】
1. 从血清、血浆、细胞培养液及体液等样品中提取少量miRNA，按照标本5倍体积加入裂解液LB，将裂解混合物混合均匀。
注意：建议使用标本用量为200μl，过多的样品可能会导致抽提产量的降低。
血清/血浆标本量/μl | 步骤1 裂解液LB/μl |
≤50 | 250 |
100 | 500 |
200 | 1000 |
2. 往裂解物中加入1/10体积的吸附液BD和3.5μl助沉剂PA，并加入1.5倍体积的无水乙醇，用移液器吹打数次混匀，室温静置30min。
注意：由于实验室常用1.5ml离心管，建议裂解物可分成两管，然后分别向其内加入1.5倍体积无水乙醇，1/10体积的吸附液BD和3.5μl 助沉剂PA。
例：如每管含有裂解物500μl，则加入50μl 吸附液BD，3.5μl 助沉剂PA和750μl无水乙醇。
3. 立即吸取700μl样品以及有可能形成的沉淀，加入带有2ml收集管的离心纯化柱。轻盖盖子，10,000 x g，室温(15–25°C)离心15s。
4. 将剩余的样品转移至离心纯化柱，重复第3步。
5. 往离心纯化柱中加入600μl漂洗液WB1，轻盖盖子，10,000 x g，室温离心1min，弃尽废液。
注意：第一次使用前请按照标签提示往WB1中加入适量无水乙醇。
6. 往离心纯化柱中加入500μl漂洗液WB2，轻盖盖子，10,000 x g，室温离心1min，弃尽废液。
注意：第一次使用前请按照标签提示往WB2中加入适量无水乙醇。
7. 将往离心纯化柱中加入500μl 80%无水乙醇，轻盖盖子，10,000 x g，室温离心1 min，弃尽废液。
注意: 80%无水乙醇配制使用去核酸酶水即200 μl去核酸酶水加800 μl无水乙醇。
8. 10,000 x g离心空柱1min，干燥硅胶膜。
注意：完全去除洗液对最后溶解是非常重要的，洗液的残留会影响最终的洗脱。
9. 将离心柱转移至新的无核酸酶的1.5ml离心管中，往硅胶膜中央滴加40μl洗脱液EB，轻盖管盖，室温静置5min，11,000xg离心1min洗脱RNA。
注意： 1. 转移离心柱时注意不要触及流穿废液，避免污染离心柱。
2. 洗脱体积不宜小于20μl，否则会影响洗脱效果。
3. 40μl洗脱液EB 离心回收后，损失的样品体积约为5μl，回收液体积约35μl 。
10.（可选步骤） 把洗脱液滴加回硅胶膜重复第9步洗脱以提高得率。
11. 如需后续操作，请始终将溶解的RNA至于冰上，保存请置于-80℃。
